Genetic mutations in SPINK1, CFTR, CTRC genes in acute pancreatitis

TEMA: Mutaciones genéticas en los genes SPINK1 , CFTR , CTRC en la pancreatitis aguda

OBJETIVO: determinar la frecuencia de mutaciones genéticas en pacientes con pancreatitis aguda e investigar su relación con la etiología y el curso clínico.

MUESTRA BIOLÓGICA: sangre periférica

TIPO DE ÁCIDO NUCLÉICO: ADN Genómico

EXTRACCIÓN DE ADN: en tubos con EDTA

GENES AMPLIFICADOS: 

SPINK1 con 112 pb

CFTR con 130 pb

CTRC con 127 pb 

TIPO DE PCR: PCR alelo-específica (ASA-PCR) y fusión de alta resolución (HRM) -PCR

PASOS DE PCR: desnaturalización inicial de 95 ° C durante 1 minuto, seguido de 35 ciclos de 15 segundos a 95 ° C, 15 segundos a 60 ° C, 30 segundos a 72 ° C y una extensión final a 72 ° C para 7 min.

VISUALIZACIÓN: sistema de electroforesis de microchip MCE-202 Multi NA

Bibliografía:

• Koziel, Gluszek, Kowali, Pieciak. Mutaciones genéticas en los genes SPINK1, CFTR, CTRC en la pancreatitis aguda. PMC[Internet]. 2015[ 29 May 2018]. Disponible en:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4476205/